由真菌(林伯氏白色念球菌,Tritirachium album Limber)產(chǎn)生的蛋白酶K，是一種枯草蛋白酶類(lèi)的高活性,切割活性較廣的絲氨酸蛋白酶。它切割脂族氨基酸和芳香族氨基酸的羧基端肽鍵，用于生物樣品中蛋白質(zhì)的一般降解。此酶經(jīng)純化去除了RNA酶和DNA酶活性。由于蛋白酶K在尿素和SDS中穩定，還具有降解天然蛋白質(zhì)的能力，因而應用很廣泛，包括制備脈沖電泳的染色體DNA，蛋白質(zhì)印跡以及去除DNA和RNA制備中的核酸酶。主要用于基因診斷試劑盒、基因組DNA提取試劑盒、RNA提取試劑盒中去除DNA和RNA制備中的核酸酶，也可以用于提取組織中非蛋白成份降解含有蛋白質(zhì)的雜質(zhì)。蛋白酶K于1989年在細菌中成功表達并投入市場(chǎng)。

此項目新開(kāi)發(fā)出來(lái)由黑曲霉生產(chǎn)的蛋白酶K。其蛋白酶K是分泌型，主要產(chǎn)于胞外，因此純化過(guò)程簡(jiǎn)單，成本較低。

市場(chǎng)前景

初步估計蛋白酶K市場(chǎng)已超過(guò)百萬(wàn)美元。目前中國市場(chǎng)上大部分蛋白酶K都是來(lái)源于國外,最主要的是Merck，Roche，Fermentas和Amresco，其中Roche，Fermentas是用畢赤酵母表達的蛋白酶K(專(zhuān)利號: US 7,368,274)。國外價(jià)格在500元-600元左右/每100mg (5000元/克)。國內進(jìn)口蛋白酶K每克售價(jià)在3000元到4000元。目前國內有一家公司（金普諾安蛋白質(zhì)工程技術(shù)（北京）有限公司）針對蛋白酶K基因進(jìn)行了突變并在畢赤酵母中成功表達。

技術(shù)特點(diǎn)

本項目構建了高效表達蛋白酶K的工程菌株，獲得的蛋白酶K的酶活已達到>4000單位/毫升(福林法)，蛋白量接近1克/升(蛋白質(zhì)電泳膠)，目前已經(jīng)申請專(zhuān)利1項。

投資與效益分析

目前，純化后的蛋白酶K國外市場(chǎng)價(jià)格每100mg 在500元-600元 (5000元/克)，本項目蛋白酶K的發(fā)酵成本低于20元/克，提純成本預計為100元/克，總成本將低于300元/克。

目標客戶(hù)為Merck，Roche，Fermentas，sigma和國內基因診斷試劑盒、基因組DNA提取試劑盒、RNA提取試劑盒等公司。