一、蛋白質(zhì)組樣品提取和處理試劑盒

膜蛋白質(zhì)等疏水性蛋白質(zhì)存在著(zhù)疏水性強，在樣品預處理過(guò)程中難以溶解與酶解的問(wèn)題，嚴重制約了膜蛋白質(zhì)組和全蛋白質(zhì)組分析的鑒定覆蓋度。

本團隊研發(fā)的樣品提取和處理試劑盒能夠實(shí)現常規量或微量組織、細胞和體液樣品中蛋白質(zhì)的高效提取、溶解與酶解，尤其適合膜蛋白質(zhì)等強疏水性蛋白質(zhì)或全蛋白質(zhì)組的深度覆蓋定性和定量研究。

已申請3項發(fā)明專(zhuān)利，其中1項獲得授權。

試劑盒中配有：蛋白質(zhì)提取試劑（10 mL）、超濾離心管、蛋白質(zhì)處理試劑1和2，以及緩沖液（50 mL）。

該試劑盒具有以下優(yōu)點(diǎn)：

高溶解度提取——較現有的商品化試劑具有更強的溶解能力（右圖）

普適性——適合所有的組織、細胞和體液樣品預處理

兼容性——酶解產(chǎn)物無(wú)需純化，能直接與任何色譜分離模式及ESI源或MALDI源質(zhì)譜聯(lián)用

簡(jiǎn)便快捷——樣品中蛋白質(zhì)從提取到酶解前僅需4小時(shí)

無(wú)需額外設備——僅需一臺微型臺式離心機、組織勻漿器和移液器即可滿(mǎn)足要求

采用該試劑盒對1000個(gè)HeLa細胞進(jìn)行處理，采用Lumos三合一質(zhì)譜儀（Thermo Fisher）鑒定，分離梯度60 min，單次分析可實(shí)現3000個(gè)以上蛋白質(zhì)的高效鑒定。

二、外泌體富集及蛋白質(zhì)處理試劑盒

外泌體，由于攜帶脂類(lèi)、蛋白質(zhì)、RNA等多種重要的生物功能分子，因此，在臨床診斷和治療監控中具有重要應用價(jià)值。然而，外泌體的環(huán)境組成非常復雜，因此，如何獲得高純度的外泌體是首要解決的關(guān)鍵問(wèn)題。目前，分離外泌體的金標準方法是超速離心法，然而，該方法采用多次重復的超高速離心會(huì )造成外泌體破碎，回收率很低。此外，System Biosciences和Life Technologies等公司也先后開(kāi)發(fā)了一系列針對不同樣品來(lái)源的外泌體提取試劑盒，但這些試劑盒價(jià)格昂貴，不適合大規模的臨床樣品分析。

為了解決上述問(wèn)題，本研究團隊開(kāi)發(fā)了一種具有普適性的外泌體高效富集試劑盒。具有樣品用量少（血液樣品20-100 μL，尿液樣品1-2 mL）；操作條件簡(jiǎn)單（僅需要普通離心機和冰盒即可）、外泌體富集時(shí)間短（ 1-2小時(shí)）等優(yōu)點(diǎn)。

為了實(shí)現對微量外泌體蛋白質(zhì)組的高效處理和分析，本研究團隊還自主開(kāi)發(fā)了一種純化和處理外泌體蛋白質(zhì)的試劑盒，可完成外泌體蛋白質(zhì)的富集、標記和酶解等多個(gè)步驟，整個(gè)處理時(shí)間不超過(guò)5小時(shí)。此外，該試劑盒還具有抗干擾強、蛋白質(zhì)回收率高、所需設備簡(jiǎn)單等特點(diǎn)。能夠滿(mǎn)足科研，以及臨床持續分析、樣品數量大，以及樣品量有限等苛刻要求。

目前已申請2項國家發(fā)明專(zhuān)利和1項國際發(fā)明專(zhuān)利。

三、蛋白質(zhì)組定量標記試劑盒

為了實(shí)現蛋白質(zhì)組的精準定量，本研究團隊還發(fā)展了具有自主知識產(chǎn)權的蛋白質(zhì)組定量標記試劑盒，并構建了完善的樣品預處理、分離、質(zhì)譜采集和數據解析的體系。該試劑盒不受限于樣品種類(lèi)，可實(shí)現高準確度、高精密度、高通量、高覆蓋度的蛋白質(zhì)組定量分析。相比于目前常用的蛋白質(zhì)組定量試劑盒（iTRAQ、TMT），不僅定量準確度顯著(zhù)提高，而且可以在寬動(dòng)態(tài)范圍內實(shí)現準確定量。在相當的定量通量下（6-8重樣品同時(shí)分析），分析成本顯著(zhù)降低。具有大規模蛋白質(zhì)組定量分析的應用潛力。該試劑盒已被成功用于病變標志物的發(fā)現、生物過(guò)程及疾病的發(fā)生發(fā)展中多時(shí)間多條件監控、食品蛋白質(zhì)組中目標蛋白質(zhì)的絕對定量等領(lǐng)域。

已申請3項發(fā)明專(zhuān)利，其中1項獲得授權。

合作要求及方式

技術(shù)轉讓、技術(shù)服務(wù)、技術(shù)入股、合作開(kāi)發(fā)。